ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА КОЖИ И ПРЕДРАКОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ КОЖИ

RU (11) 2146927 (13) C1

(51) 7 A61K31/665, A61K9/06

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Статус: по данным на 10.08.2007 - действует

(14) Дата публикации: 2000.03.27

(21) Регистрационный номер заявки: 98112707/14

(22) Дата подачи заявки: 1998.07.08

(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 1998.07.08

(45) Опубликовано: 2000.03.27

(56) Аналоги изобретения: DE 3634745 A, 21.04.88. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М. Медицина, 1986, ч.2, с.467-468. Ризположенский Н.И. Байков Л.В. Зверева М.А. Синтез глицидиловых эфиров кислот фосфора//Доклады АН СССР, 1964, 5, 155, с.1137-1139.

(71) Имя заявителя: Институт органической и физической химии им.А.Е.Арбузова Казанского научного центра РАН; Казанский государственный медицинский университет им.С.В.Курашова; Казанское химико-фармацевтическое производственное объединение "Татхимфармпрепараты"

(72) Имя изобретателя: Студенцова И.А.; Мокринская И.С.; Романов В.И.; Гараев Р.С.; Хафизьянова Р.Х.; Залялютдинова Л.Н.; Егорова С.Н.; Шадрина В.М.; Муслинкин А.А.; Левин Я.А.; Гозман И.П.; Гурылев Э.А.

(73) Имя патентообладателя: Институт органической и физической химии им.А.Е.Арбузова Казанского научного центра РАН; Казанский государственный медицинский университет им.С.В.Курашова; Казанское химико-фармацевтическое производственное объединение "Татхимфармпрепараты"

(98) Адрес для переписки: 420088, Казань, Татарстан, ул.акад.Арбузова, 8, ИОФХ им А.Е.Арбузова, патентный отдел

(54) ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА КОЖИ И ПРЕДРАКОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ КОЖИ

Изобретение относится к медицине, а именно к лекарственным препаратам для лечения рака кожи и предраковых заболеваний кожи. Задачей изобретения является создание высокоэффективного лекарственного препарата для лечения рака и предраковых заболеваний кожи. Эта цель достигается мазью глицифона, в которую входит ланолин, вазелин, эмульсионные воски и диглицидиловый эфир метилфосфоновой кислоты химической формулы. Лекарственный препарат характеризуется высокой избирательной противоопухолевой активностью, отсутствием побочных реакций и хорошим косметическим эффектом. 1 з.п. ф-лы. 3 табл.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Изобретение относится к медицине, к препаратам для лечения рака и предраковых заболеваний кожи, а именно касается нового лекарственного средства и его лекарственной формы.

Известно, что для лечения этих заболеваний использовались 0,5% колхаминовая мазь, 25% мазь с подофиллином, жидкость Гордеева N 2, жидкость Карчаули, но они из-за недостаточной избирательности действия или высокой токсичности не нашли широкого применения.

В настоящее время для лечения базалиом, рака кожи применяются 30% и 50% мазь проспидиновая и для лечения рака кожи I и II стадии - мазь колхаминовая 0,5%. Мазь колхаминовая имеет сложный состав: кроме колхамина, содержит антисептические средства тимол и этиловый спирт; а также антибиотик - синтомицин. Она оказывает кожно-резорбтивное действие, которое проявляется лейкопенией и другими побочными эффектами. При использовании проспидиновой мази возможны гиперемия, отечность, фибринозные налеты окружающей здоровой ткани. (Машковский М.Д. Лекарственные средства, М. "Медицина", 1993 г.). Наиболее близким к заявляемому изобретению является цитостатическое лекарственное средство, содержащее в качестве активного вещества соединение с глицидильными группами и фармацевтический разбавитель - прототип (DE N 3634745).

Однако ассортимент противоопухолевых средств местного действия при раке кожи и преканцерозах ограничен.

С целью расширения ассортимента мазей с местной антибластомной активностью была поставлена задача - создание нового средства для лечения рака и предраковых заболеваний кожи.

Задача решена тем, что лекарственное средство включает в себя действующее вещество и фармацевтическую основу. В качестве действующего вещества использован диглицидиловый эфир метилфосфоновой кислоты (Глицифон) следующей химической структуры:

Химическое соединение - диглицидиловый эфир метилфосфоновой кислоты известно и описано в литературе (Ризположенский Н.И. Бойко Л.В. Зверева М. А. "Синтез глицидиловых эфиров кислот фосфора". - Доклад АН СССР, 1964, - 155, 5, с. 1137-1139).

Применение этого соединения в медицине в литературе не описано.

Его лекарственной формой является мазь на основе ланолина, вазелина и эмульсионного воска при следующих соотношениях компонентов,%:

Диглицидиловый эфир метилфосфоновой кислоты (Глицифон) - 5 - 50

Ланолин безводный - 50 - 94

Вазелин - Не более 45

Эмульсионные воски - Не более 10

Введение глицифона ниже нижнего предела не обеспечивает лечебного эффекта, выше верхнего предела - нарушается стабильность лекарственной формы.

Введение ланолина безводного ниже нижнего предела не обеспечивает функцию гидрофилизирующего и стабилизирующего компонента мазевой основы.

Введение вазелина улучшает потребительские свойства мази - придает ей пластичность. Введение вазелина выше верхнего предела не позволяет получить агрегативно устойчивую систему.

Введение эмульсионных восков в мазь способствует гидрофилизации вазелина и исключает появление фазовой гетерогенности поверхности и структуры мази. Введение эмульсионных восков выше верхнего предела приводит к их выкристаллизации из мази.

Название "Глицифон" присвоено препарату решением Номенклатурной комиссии Фармакологического Комитета Минздрава СССР 24.01.71 г. (Протокол N 1).

По сравнению с известными лекарственными препаратами предлагаемая мазь обладает существенными преимуществами: она проявляет высокую избирательность действия на бластоматозные клетки, сочетающуюся с антимикробной активностью и безвредностью для окружающих нормальных тканей, а также отсутствием побочного кожно-резорбтивного действия. Ее преимуществом является и то, что мазь может применяться с хорошим косметическим эффектом при локализации опухоли и преканцерозов на коже в области век, спинки носа, ушной раковины и наружного слухового прохода, а также ее эффективность при рецидивах опухолей после хирургического и лучевого лечения.

Предлагаемое средство было подвергнуто экспериментальному и клиническому изучению. Мазь прошла успешные клинические испытания в ведущих онкологических клиниках г. Москвы, С.-Петербурга, Казани и др. городов.

Высокую контактную антибластомную активность при перевивных асцитных опухолях мышей и крыс, ее безвредность для кроветворной системы животных-опуолевоносителей, а также эффективность мази глицифоновой при раке и предраковых заболеваниях кожи подтверждают следующие примеры.

Пример 1. Влияние Глицифона на рост перевивных асцитных опухолей.

Методика.

Опыты проведены на 220 мышах и 74 крысах с асцитными перевивными опухолями. Были использованы штаммы асцитных опухолей, широко применяемые в экспериментальной химеотерапии опухолей: саркома 37, опухоль Эрлиха, лимфома N K/Ly, саркома 180, опухоль яичника крыс. (Погосянц Е.Е. Киселева Н.С. "Опухолевые штаммы, поддерживаемые в институте экспериментальной и клинической онкологии АМН СССР". - Вопросы онкологии, 1963, 9, 8 - с. 103-116).

Перевивка опухолей проводилась по общепринятой методике (Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапи. - Медицина, М, 1971. - 539 с.).

При внутрибрюшинной перевивке опухолей введением асцитической жидкости ее разводили 4% раствором цитрата натрия на физиологическом растворе с таким расчетом, чтобы в 0,2 мл разведенной асцитической жидкости содержалось по 3 миллиона опухолевых клеток.

Лечение начинали через сутки после трансплантации. Глицифон в свежеприготовленных водных растворах вводили ежедневно внутрибрюшинно крысам по 50 мг/кг, мышам - по 60 мг/кг в течение 10 дней. В процессе проведения экспериментов регистрировали массу мышей и крыс. После завершения курса лечения животных декапитировали под легким эфирным наркозом, определяли объем асцитической жидкости. Сопоставляя эти величины в опыте и контроле, подсчитывали процент торможения роста опухолей по формуле:

где K - объем асцитической жидкости в контроле,

O - объем асцитической жидкости в опытной группе.

Все результаты экспериментов обработаны статистическим методом непрямых разностей (Монцевичуте-Эрингене Е.В. Упрощенные математическо-статистические методы в медицинской исследовательской работе. - Патологическая физиология и экспериментальная терапия, 1964, N 4, с. 71-78).

Результаты

Оценка антибластомной активности показала, что глицифон тормозит рост асцитных опухолей на 80-100%, причем у значительной части животных в конце опыта асцитической жидкости в брюшной полости обнаружено не было (см. табл. 1).

Заключение

Глицифон проявляет высокую контактную антибластомную активность при перевивных асцитных опухолях крыс и мышей без выраженного общетоксического действия.

Пример 2. Безвредность внутрибрюшинного введения глицифона для кроветворной системы крыс с асцитной опухолью

В серии экспериментов на крысах с опухолью яичника были сопоставлены показатели периферической крови опытных и контрольных крыс. Анализ крови 10 опытных (после 10-дневного курса внутрибрюшинных инъекций глицифона по 50 мг/кг) и 10 контрольных (введение дистиллированной воды) животных проводили по общепринятой методике.

Результаты исследований приведены в табл. 2.

Установлено, что число лейкоцитов, эритроцитов, содержание гемоглобина и цветной показатель леченых животных достоверно не отличаются от аналогичных показателей контрольных крыс. Оценка качественного состава лейкоцитов выявила увеличение числа моноцитов в крови опытных животных (см. табл. 2)

Заключение

Глицифон при 10-дневном введении крысам с опухолью яичника по 50 мг/кг ежедневно не проявляет гематотоксического эффекта.

Пример 3. Результаты клинического изучения эффективности местного применения мази глицифоновой при лечении больных раком кожи и базалиомами

Характеристика больных

Проведено лечение 445 больных с различными клиническими типами базалиом и 20 больных плоскоклеточным раком кожи I стадии на базе кафедры кожных и венерических болезней Казанского медицинского университета. Среди больных были 176 мужчин и 289 женщин в возрасте от 30 до 83 лет.

По клиническим типам базалиомы распределялись следующим образом: опухолевый тип - у 230 больных, язвенный - у 9, поверхностный тип - у 206.

У подавляющего большинства больных очаги поражения локализовались в области лица, реже - на туловище и конечностях. У 440 больных очаги поражения были единичны, у 5 - множественными. Давность заболевания составляла у 100 больных - до 1 года, у 230 - до 3 лет, у 135 - до 5 и более лет.

Диагноз устанавливался на основании результатов клинических, гистологических или цитологических исследований.

Перед началом лечения больные подвергались клиническому обследованию. Кроме того, до начала и в конце лечения проводились: общий анализ крови и мочи, определение содержания холестерина, протромбина, билирубина, глюкозы крови, изучалась протеинограмма.

Методика лечения

Лечение больных в большинстве случаев проводили амбулаторно. Перед наложением мази кожу в очаге и вокруг него протирали марлевым или ватным шариком, смоченном в спирте. На опухоль накладывали 30% глицифоновую мазь следующего состава:

Диглицидиловый эфир метилфосфоновой кислоты (глицифон) - 30,0

Ланолина безводного - 60,0

Вазелина - 10,0

Доза мази зависела от размера опухоли - от 0,8 до 1,5 г - с захватом окружающей кожи до 0,5 см и закрывали салфеткой из 4 слоев марли. Между двумя слоями салфетки закладывали кусочек вощаной бумаги для того, чтобы мазь не пропитывали верхние слои салфетки. Салфетку фиксировали липким пластырем. Аппликации глицифоновой мази применяли 1 раз в день. При каждой перевязке некротизированную ткань с поверхности очага удаляли тупым скальпелем.

Результаты лечения

Обычно после 1-ых трех аппликаций глицифоновой мази отмечалось некоторое разрыхление опухоли. Вокруг нее возникала незначительная гиперемия. После 6 и более аппликаций опухоль подвергалась разрушению, появлялся дефект ткани в очаге. Нагноения в местах аппликаций не отмечалось ни в одном случае. Для полного разрушения опухоли проводилось от 9 до 12, реже - 15 аппликаций.

После прекращения аппликаций глицифоновой мази на образовавшийся дефект накладывались асептические повязки до рубцевания, которое происходило в течение 15-20 дней. На месте опухоли оставался слегка втянутый, депигментированный, гладкий рубец. В дальнейшем рубец упрощался и становился малозаметным.

При лечении различных клинических типов базалиом отмечено, что мелкоузловые формы (опухолевый тип) при локализации в области лба, носа более резистентны к терапии глицифоновой мазью. Поэтому при этих формах базалиом число аппликаций доводили до 15.

Как правило, при других локализациях опухоли выраженных перифокальных изменений окружающих тканей не наблюдалось.

Особенностью применения глицифоновой мази при локализации опухолей в орбитальной области является то, что после 5-6 аппликаций иногда наблюдался отек разной степени выраженности, что обычно не препятствовало продолжению лечения. Этот отек, по-видимому, объясняется особенностью анатомического строения данной области.

При лечении больных раком кожи и базалиомами глицифоновой мазью не выявлено каких-либо выраженных побочных эффектов. Общее состояние больных не нарушалось. Не изменялись показатели периферической крови, общего анализа мочи, а также содержание билирубина, протромбина, уровень глюкозы в крови, протеинограмма.

Из 465 больных у 462 достигнуто стойкое клиническое выздоровление. Сроки наблюдения от 1 года до 7 лет. Причиной неудач первичного лечения у 3 больных явилось недостаточное количество аппликаций по вине самих больных. Всем 3 больным в дальнейшем проведено повторное лечение глицифоновой мазью с хорошими результатами.

Заключение

Мазь глицифоновая является эффективным терапевтическим средством при лечении больных с различными клинико-морфологическими типами базалиом и плоскоклеточным раком кожи. Метод лечения прост, доступен и рекомендован для широкого клинического применения.

Эти результаты лечения подтверждены в НИИ онкологии им. Н.Н.Петрова и Московским научно-исследовательским клиническим институтом им. М.Ф.Владимирского.

Пример 4. Оценка эффективности глицифоновой мази, содержащей эмульсионные воски.

По схеме, приведенной в примере 3, было проведено лечение 10 больных базалиомами глицифоновой мазью, следующего состава:

Диглицидиловый эфир метилфосфоновой кислоты (Глицифон) - 30,0

Ланолин безводный - 59,0

Вазелин - 10,0

Эмульсионные воски - 1,0

Клинические наблюдения показали, что существенной разницы в характере действия мази, содержащей эмульсионные воски, не выявлено. Во всех 10 случаях был получен лечебный эффект и заживление.

Преимуществом мази, содержащей эмульсионные воски, является ее гомогенность и агрегативная устойчивость в процессе хранения, что подтверждено визуальными наблюдениями в течение 2-х лет и определением коллоидной стабильности методом центрифугирования образцов (в течение 5 мин при 6000 об/мин) на разных сроках хранения. В то же время, на процесс высвобождения глицифона-субстанции из мази добавление эмульсионных восков существенного влияния не оказывает, что подтверждают результаты специальных исследований, приведенных ниже.

О способности лекарственных веществ проникать в кожу можно судить по результатам исследования его высвобождения in vitro (Алюшин М.Т. Влияние вспомогательных веществ на биологическую доступность лекарств. - В кн. Проблемы тары, упаковки и вспомогательных материалов в фармации. - ВНИИМИ. М. 1978, с. 53-56).

Изучено влияние эмульсионных восков на высвобождение глицифона из мазей методом равновесного диализа по Крувчинскому через поскорлупную оболочку куриного яйца.

Методика

0,5 г мази (точную навеску) отвешивали на кружок пергаментной бумаги и помещали в диализатор на мембрану бумагой кверху, равномерно распределяя мазь по всей ее поверхности. Диализатор помещали в химический стакан вместимостью 100 мл, куда предварительно наливали 30 мл дистиллированной воды температуры 37oC. Прибор помещали в термостат (37oC 1oC). Через 0,5, 1, 2, 4, 6, 8 и 24 часа отбирали пробы путем полной замены рецепторной среды. Количественное определение глицифона в пробах проводили спектрофотометрически на СФ-46 по фосфору, по образованию окрашенного ванадатмолибдатфосфорного комплекса после минерализации концентрированной серной кислотой в присутствии перманганата калия по методике, приведенной в ВФС 42-2277-93 на глицифон-субстанцию.

Расчет количественного содержания глицифона в пробах проводили по формуле

где X - содержание глицифона в пробе, %;

Dx - оптическая плотность анализируемого раствора;

D0 - оптическая плотность стандартного раствора;

0,000008 - содержание фосфора в рабочем стандартном растворе, г;

a - навеска мази, взятая для анализа, г;

30 - объем диализной среды, мл;

Расчет количества глицифона, высвободившегося из мази, проводили по формуле

где X - количество глицифона, высвобожденного из мази,%;

n - порядковый номер пробы;

Ci - количество глицифона, высвободившегося из i пробы,%.

Статистический анализ полученных данных проводили по методике ГФ XI.

Результаты высвобождения глицифона из мазей представлены в табл. 3.

Из данных табл. 3 следует, что введение эмульсионных восков в состав мази в количестве 1% не влияет на скорость и степень высвобождения глицифона из мази

Пример 5. Лечение больных предраковыми заболеваниями кожи: сенильными кератозами и болезнью Бовена.

Характеристика больных

С сенильными кератозами было 36 больных, из них мужчин - 14, женщин - 22. Больные распределялись по возрасту следующим образом: от 40 до 50 лет - 1, от 51 до 60 - 9, от 61 до 70 - 15, старше 70 - 11 человек.

Давность заболевания до 6 месяцев отмечена у 5 больных, от 6 месяцев до 1 года - у 7, от 1 года до 2 лет - у 7, от 2 до 5 - у 13 и от 5 до 12 лет - у 4.

Очаги поражения у подавляющего большинства больных (у 28 из 36) локализовались на листе, у одного были множественными. Размер очагов от 0,5 до 1 см отмечались у 30 и от 1 до 1,5 см в диаметре - у 6 больных.

Очаги поражения представляли собой шелушащиеся пятна темного цвета с четкими границами и слегка шероховатой поверхностью или бляшки округлой, овальной или неправильной формы. Бляшки часто были покрыты сероватой плотной коркой или сосочковыми выростами.

С болезнью Бовена было 2 больных (мужчина 67 лет и женщина 47 лет). Размер очага поражения у мужчины отмечался 2 х 3 см, давность заболевания - 2 года, локализация - левая подвздошная область; размер очага у женщины был 1,5 х 2 см, давность заболевания - 11 лет, локализация в межлопаточной области.

У этих больных очаги поражения представляли собой бляшки желтовато-красного цвета, неправильной формы с четкими границами. Края бляшек были слегка приподняты. На поверхности очагов имелись бородавчатые разрастания, мелкопластинчатое шелушение, кровянистые корочки.

Методика лечения

Лечение больных проводили амбулаторно аппликациями 30% мази глицифоновой состава: глицифона 30,0, ланолина безводного 60,0, вазелина 10,0. Перед наложением мази кожу в очаге и вокруг него протирали ватным шариком, смоченным в спирте. Вокруг очага, отступая от его края на 0,5 см, наносили цинковую пасту. Затем на очаг наносили мазь глицифоновую с захватом окружающей кожи на 0,5 см и накладывали салфетку из 4 слоев марли. Между двумя слоями салфетки вкладывали кусочек вощаной бумаги для того, чтобы мазь не пропитывала верхние слои салфетки. Салфетку фиксировали липким пластырем. Аппликации глицифоновой мази делали 1 раз в день. Пои каждой перевязке некротизированную ткань удаляли с поверхности очага.

При сенильных кератозах делали (в зависимости от размера очага) от 5 до 10 аппликаций. В дальнейшем накладывали на участки поражения асептические повязки до полного заживления. Дефекты, образовавшиеся на месте очагов в процессе лечения, заживали в течение 7-10 дней.

Результаты лечения

У всех больных 38 достигнуто стойкое клиническое выздоровление. Сроки наблюдения от 2 до 5 лет. При лечении больных сенильными кератозами и болезнью Бовена не выявлено каких-либо побочных эффектов. Общее состояние больных не нарушалось. Не изменялись показатели периферической крови.

Заключение

Мазь глицифоновая 30% является эффективным средством лечения преканцерозов кожи.

Таким образом, приведенные результаты демонстрируют высокую эффективность мази глицифоновой при лечении преканцерозов и рака кожи.

На основании итогов клинических испытаний фармакологический комитет рекомендовал разрешить медицинское применение у взрослых и детей в качестве местного противоопухолевого средства при раке кожи, базалиомах, кератозах и др. и промышленный выпуск препарата глицифон в виде 30% мази (протокол N 7 от 11.04.1990 г.).

После разработки нормативно-технической документации Министерство здравоохранения и медицинской промышленности РФ приказом N 4 от 24.02.94 г. утвердило Временные Фармакопейные статьи ВФС 42-2277-93 на глицифон - субстанцию и ВФС 42-2276-93 на глицифоновую мазь и разрешило применение в медицине и промышленное производство глицифона и его мази.

Действующее вещество заявляемого лекарственного средства (глицифон-субстанцию) синтезирут известными способами, например, при взаимодействии дихлорангидрида метилфосфоновой кислоты с глицидилом в присутствии едкого кали в качестве акцептора выделяющегося хлористого водорода и в среде хлористого метилена. Из реакционной массы отфильтровывают KCl, фильтрат упаривают, из остатка после упаривания выделяют целевой продукт перегонкой в вакууме.

Лекарственную форму глицифона в лабораторных условиях готовят следующим способом. Мазевую основу (ланолин безводный, вазелин, эмульсионные воски) плавят в фарфоровой чашке при температуре 60-70oC, в горячем виде профильтровывают через капроновую ткань на воронке горячего фильтрования в лабораторный мазевой котел. Добавляют к основе глицифон-субстанцию и перемешивают при помощи мешалки с наклонными лопастями в течение 1 часа при скорости мешалки 100 об/мин и температуре 38oC. Далее в течение 15 мин перемешивают мазь вручную при помощи шпателя-ложки. Готовую мазь фасуют. Мазь желтого, желто-бурового или зеленовато-бурого цвета, со своеобразным запахом.

Промышленная применимость. Заявляемое лекарственное средство находит применение в медицине. Выпуск первых опытно-промышленных серий 30% мази глицифоновой запланирован на КПХФО "Татхимфармпрепараты". (г. Казань).

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Лекарственный препарат для лечения рака и предраковых заболеваний кожи, включающий действующее вещество с глицидильными группами и фармакологический разбавитель, отличающийся тем, что в качестве действующего вещества он содержит диглицидиловый эфир метилфосфоновой кислоты общей формулы

а в качестве разбавителя - ланолин, вазелин при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Диглицидиловый эфир метилфосфоновой кислоты - 5 - 50

Ланолин безводный - 50 - 94